Beskrivelse: | Resultat af analysen: TruCulture ustimuleret: TNF-α, IL-1b, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12p40, IL-17A, INF-α og IFN-γ. TruCulture LPS stimulation: TNF-α, IL-1b, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12p40, IL-17A, INF-α og IFN-γ. TruCulture anti-CD3/CD28 stimulation : TNF-α, IL-1b, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12p40, IL-17A, INF-α og IFN-γ. TruCulture Poly I:C stimulation : TNF-α, IL-1b, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12p40, IL-17A, INF-α og IFN-γ. TruCulture R848 stimulation : TNF-α, IL-1b, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12p40, IL-17A, INF-α og IFN-γ.
Metodebeskrivelse: In vitro stimulation af fuldblod i TruCulture stimulationstubes med 5 forskellige stimuli (Ustimuleret, LPS, anti-CD3/CD28, Poly I:C, R848). Stimulatoinstubes inkuberes 22 timer ved 37 oC. Efterfølgende måles følgende 9 cytokiner i supernatanten som udtryk for induceret immuncelle funktion: TNF-α, IL-1b, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12p40, IL-17A, INF-α og INF-y.
Stimuli beskrivelse: Ustimuleret: Negativ kontrol, indeholder udelukkende cellekultur medie. Udtryk for baseline in vivo aktivering. LPS: Bakterielt endotoxin (E.coli, O111:B4), microbe associated molecular pattern (MAMP) og TLR4 agonist. Stimulerer det innate immunrespons. Anti-CD3/CD28: Antistoffer mod CD3 og antistoffer mod CD28, der stimulerer T celle receptoren samt co-stimulatorisk receptor. Stimulerer t-celler. Poly I:C: Polyinosinic:polycytidylic acid, microbe associated molecular pattern (MAMP), DS-RNA analog. TLR3 (intracellulær) agonist. Stimulerer det innate og adaptive immunrespons. Efterligner DS-RNA virus infektion. R848: Syntetisk agonist, efterligner SS-RNA, microbe associated molecular pattern (MAMP). TLR7 & TLR8 (intracellulære) agonist. Stimulerer det innate og adaptive immunrespons. Efterligner SS-RNA virus infektion.
Der gemmes supernatant samt Trizol behandlede celle pellets fra hver af de 5 TruCulture tubes i biobank. |